抗原检测试剂
注册技术审评要点（试行）
本审评要点（试行）旨在指导注册申请人对（2019-nCoV）抗原检测试剂的产品设计开发及验证确认过程，并指导注册申请人对该类试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。
本审评要点（试行）是对（2019-nCoV）抗原检测试剂的一般要求，注册申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。
本审评要点（试行）是对注册申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，也不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要提供详细的研究和验证资料，相关人员应在遵循法规的前提下使用本审评要点（试行）。
本审评要点（试行）是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善以及科学技术的不断发展，本审评要点（试行）相关内容也将适时进行调整。
一、适用范围
本审评要点（试行）适用于（2019-nCoV）抗原检测试剂注册申请和变更注册申请的情形。
二、注册审查要点
（一）监管信息
1. 产品名称及分类编码
产品名称应符合《体外诊断试剂注册与备案管理办法》（国家市场监督管理总局令第48号）及相关法规的要求，如（2019-nCoV）抗原检测试剂盒（免疫层析法）。根据《体外诊断试剂分类规则》，该产品按照第三类体外诊断试剂管理，分类编码为6840。
2. 其他信息还包括产品列表、关联文件、申报前与监管机构的联系情况和沟通记录以及符合性声明等文件。
（二）综述资料
综述资料主要包括概述、产品描述、预期用途、申报产品上市历史及其他需说明的内容。其中，产品描述中应详述检测原理、产品主要研究结果的总结和评价、与同类和/或前代产品的比较等。与同类和/或前代产品的比较，应着重从方法学、检验原理、产品主要性能等方面详细说明申报产品与目前市场上已获批同类产品之间的主要区别。
综述资料应符合《体外诊断试剂注册与备案管理办法》（国家市场监督管理总局令第48号）和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（2021年第122号）要求。
（三）非临床资料
1. 产品技术要求及检验报告
1.1 产品技术要求
注册申请人应当在原材料质量和生产工艺稳定的前提下，根据产品研制、前期评价等结果，依据国家标准、行业标准及有关文献资料，结合产品特性按照《医疗器械产品技术要求编写指导原则》（2022年第8号）的要求编写。该类产品作为第三类体外诊断试剂，应将主要原材料及生产工艺要求等内容作为附录附于技术要求正文后。
如有适用的国家标准、行业标准，产品技术要求的相关要求应不低于相应的要求。
1.2 产品检验报告
抗原检测试剂已有国家标准品，技术要求中应体现国家标准品的相关要求，并使用国家标准品对三批产品进行检验。
2. 分析性能研究
注册申请人应采用在符合质量管理体系的环境下生产的试剂盒进行所有分析性能研究，提交具体研究方法、试验方案、试验数据、统计分析等详细资料。
如申报产品适用不同的机型，需要提交在不同机型上进行的资料。如申报产品包含不同的包装规格，需要对各包装规格进行分析或验证。对于不同的样本类型应分别提交相应的分析性能资料。
建议着重对以析性能进行研究。
2.1 样本稳定性
注册申请人应充分考虑实际使用过程中样本采集、处理、运输及保存等各个阶段的条件，对不同类型样本的稳定性分别进行评价并提交研究资料。内容包括建议的保存条件、保存液和运输条件(如涉及）等。如样本采集后需加入保存液（采样液等），应同时对处理后的样本进行样本稳定性的研究。
另外，如果采用灭活（如热灭活等）后的样本进行检测，则应对灭活前后的至少5例临界值附近样本进行灭活因素的干扰验证，比较检测结果的差异。
2.2 适用的样本类型
如果试剂适用于多种样本类型，应采用合理方法对每种样本类型进行适用性确认。
2.3 精密度
应对精密度指标，如标准差或变异系数等的评价标准做出合理要求。精密度研究应采用临床样本，或者使用病毒培养物添加到阴性基质。
应考虑运行、时间、操作者、仪器、试剂批次和地点等影响精密度的条件，设计合理的精密度试验方案进行评价。
设定合理的精密度评价周期，例如：为期至少20天的检测，具体方案可参考性能评价相关文件进行。
用于精密度评价的临床样本应至少包含3个水平：阴性样本、临界阳性样本、（中或强）阳性样本，并根据产品特性设定适当的精密度要求：
①阴性样本：待测物浓度低于检测限或为零浓度，阴性检出率应为100%（n≥20）。
②临界阳性样本：待测物浓度略高于试剂盒的检测限，阳性检出率应≥95%（n≥20）。
③中/强阳性样本：待测物浓度呈中度到强阳性，阳性检出率为100%且CV≤15%（n≥20）,或条带结果显色均一。
2.4 包容性
使用具有时间和区域特征性的不同来源的至少10例临床样本或病毒培养液进行验证，验证内容应包括重复性、检出限等，提供样本及浓度的确认方法、试验数据。样本应覆盖目前国内变异株的常见类型，以考察对不同变异株的检出能力。
2.5 检测限
2.5.1检测限的确定
建议对病毒进行梯度稀释后研究确定检测限，每个梯度的病毒稀释液重复3～5份，每份稀释液重复检测不少于20次，将具有95%阳性检出率的病毒水平作为检测限，抗原浓度应采用适宜的方法进行确认。
应分别选择不同来源具有代表性的3个临床样本或培养后病毒原液进行检测限的确定。
2.5.2检测限的验证
选择具有时间和区域特征性的至少3个病或临床样本（与检测限确定不同样本）在检测限浓度水平进行验证，应达到95%阳性检出率。
采用的稀释液应与适用样本类型的基质一致，可采用阴性样本进行稀释。应提供详细的病毒滴度的确定方法，同时应详细描述病毒样本的确认方法及验证结果。
2.6 分析特异性
2.6.1交叉反应验证
①地方性人类（HKU1，OC43，NL63和229E）；SARS、MERS。
②H1N1（新型甲型H1N1流感病毒（2009）、季节性H1N1流感病毒）、H3N2、H5N1、H7N9，乙型流感Yamagata、Victoria，副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,呼吸道合胞病毒A、B型，鼻病毒A、B、C组，腺病毒1、2、3、4、5、7、55型，肠病毒A、B、C、D组，EB病毒、麻疹病毒、人巨细胞病毒、轮状病毒、诺如病毒、腮腺炎病毒、水痘-带状疱疹病毒、人偏肺病毒。
③支原体、衣原体、流感嗜血杆菌、、链球菌、克雷伯菌、结核分枝杆菌、白色念珠菌。
提供所有用于交叉反应验证的病原体样本的来源、阴阳性、种属/型别和浓度/滴度确认等试验资料。建议在病原体的医学相关水平进行交叉反应的验证，如病毒浓度为105 pfu/mL或更高。
④验证不少于20份正常人样本。
2.6.2内源/外源物质干扰
建议在每种干扰物质的潜在浓度（“最差条件”）条件下进行评价，在病毒抗原临界阳性水平进行干扰试验验证。
表1 推荐用于干扰试验的物质
| 物质
| 活性成分
|
| 粘蛋白
| 纯化粘蛋白
|
| 血液
| /
|
| 抗病毒药物
| α-干扰素、扎那米韦、利巴韦林、奥司他韦、帕拉米韦、洛匹那韦、利托那韦、阿比多尔
|
| 抗生素
| 左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢曲松、美罗培南
|
| 全身性抗菌药
| 妥布霉素
|
| 过敏性症状缓解药物
| 组胺
|
| 鼻腔喷雾剂或滴鼻剂
| 苯福林、羟甲唑啉、氯化钠（含防腐剂）
|
| 鼻用皮肤类固醇
| 倍氯美松、、氟尼缩松、曲安奈德、 布、莫米松、氟替卡松
|
6.【样本要求】
说明对样本采集、处理、保存等方面的要求，包括采样要求、采集器的要求、离心条件、运送条件、保存条件及效期、冻融要求、预处理方法等，相关内容应经过前期验证。
7.【检验方法】
7.1试验环境：检测试剂及样本的复温要求等。
7.2试剂配制方法，试剂开封后使用方法等。
7.3样本稀释的方法。
7.4试验条件：操作步骤、温度、时间、仪器条件等。
7.5质量控制：操作步骤，质控结果的要求（试验有效性的判断），质控结果不符合要求的处理方式。
7.6可采用图示形式显示正确的检验操作方法、程序及注意事项等。特别注意应强调操作温度及湿度条件、读取结果的时间。
7.7特别说明检验操作过程中的注意事项。
8.【阳性判断值】（如适用）
明确阳性判断值，简要描述阳性判断值确定的试验方法。
9.【检验结果的解释】
描述检测结果的判定标准或计算方法，如有灰区判定，应详细说明灰区样本的处理方法。建议可采用图示形式描述结果判读方法（例如胶体金、荧光免疫层析法等试剂）。
10.【检验方法的局限性】
综合产品的预期用途、临床背景、检测方法及适用范围等信息，对可能出现的局限性进行相关说明。例如：
10.1本试剂盒的检测结果仅供临床参考，对患者的临床诊治应结合其症状/体征、病史、其他实验室检查及治疗反应等情况综合考虑。
10.2有关假阳性结果的可能性分析
如果样本在运输、处理过程中发生交叉污染，则可能导致假阳性结果；
试验过程中使用的耗材、设备等受污染，则可能导致假阳性结果。
10.3有关假阴性结果的可能性分析
不合理的样本采集、转运、储存及处理、样本中病原体含量过低均有可能导致假阴性结果；该病原体的突变可能会导致假阴性结果。
11.【产品性能指标】
简述以下性能指标：
11.1企业内部参考品符合率。简单介绍各企业参考品的组成、来源以及浓度梯度设置等信息。
11.2检测限：简要介绍评价方法、所用病或样本情况以及评价结果。
11.3对包容性的研究情况进行总结。
11.4对精密度的研究情况进行总结。
11.5分析特异性
11.5.1交叉反应：详述交叉反应验证的病原体种类，及有/无交叉反应的浓度水平。
11.5.2干扰物质：说明验证的干扰物质种类及有/无干扰反应的浓度水平。
11.6钩状（HOOK）效应：对高浓度钩状效应的验证情况进行总结。
11.7临床试验：简要介绍试验方法、受试者及样本、试验结果和结论等。
